本发明公开了一种用次黄嘌呤核苷酸生产三磷酸腺苷的方法。本方法为在铵离子、镁离子存在下使次黄嘌呤核苷酸以高转化率转化成一磷酸腺苷，然后经酵母发酵得到三磷酸腺苷。本发明的方法成本低、转化率高，开辟了三磷酸腺苷生产的新途径。